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HEPES它是一种两性离子有机化学缓冲剂，对细胞无毒性作用，同时它也是一种氢离子缓冲剂，能较长时间控制恒定的PH值范围，在PH值为7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。
HEPES的使用方法有两种:
1、按照所需浓度直接加入到配置的培养溶液中，过滤除菌，每1000毫升培养液中加入2.38克HEPES，溶解后用1N NaOH调 PH至7.2，过滤除菌后可使用。此时 HEPES的使用浓度为10mmol/L。
2、配成100x贮存液(1mol/L)，取23.8gHEPES溶于90ml的双蒸水中，用1NNaOH调PH至7.5-8.0，然后用水定容至100ml,过滤除菌分小瓶装，4摄氏度至20摄氏度保存。使用前取99ml培养液加入1ml贮存液最终应用浓度仍为10mmol/L。
HEPES是一种两性缓冲液，溶于水，不与金属离子形成稳定的配合物，其在pH7.2-7.4范围内具有较好的缓冲能力。多数情况下，不会干扰生物化学过程，可广泛应用于多种生物化学反应：
1、HEPES常用于各种类型生物体的细胞培养基中用作缓冲剂，细胞-细胞黏附，细胞短期聚集培养，清洗组织、细胞所用缓冲液；
2、在蛋白质研究中，PIPES常用作阳离子交换色谱法中结合缓冲液的组分和洗脱习液；
3、在DNA研究中，PIPES用作磷suan钙和 DNA沉淀物形成体系的绥冲滴 AFM以及电穿孔实验中的缓冲液。
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